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PCR基因擴(kuò)增儀是自動(dòng)化和智能化的儀器設(shè)備

更新時(shí)間:2015-11-20      瀏覽次數(shù):2990
  PCR基因擴(kuò)增儀的設(shè)計(jì)均按照DNA變性、復(fù)性和延伸三個(gè)環(huán)節(jié)以及溫度均恒、傳導(dǎo)快和升降溫迅速等原則,結(jié)合傳感技術(shù)、微電子技術(shù)和電子計(jì)算機(jī)等技術(shù)發(fā)展而成的自動(dòng)化和智能化的儀器設(shè)備
  
  PCR基因擴(kuò)增儀是利用DNA聚合酶對(duì)特定基因做體外或試管內(nèi)InVitro的大量合成,它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。目前常用的技術(shù),可以將一段基因復(fù)制為原來(lái)的一百億至一千億倍。根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn),可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀四類。
  
  PCR基因擴(kuò)增儀技術(shù)原理
  
  該技術(shù)是在模板DNA、引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下,依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)。DNA聚合酶以單鏈DNA為模板,借助一小段雙鏈DNA來(lái)啟動(dòng)合成,通過(guò)一個(gè)或兩個(gè)人工合成的寡核苷酸引物與單鏈DNA模板中的一段互補(bǔ)序列結(jié)合,形成部分雙鏈。在適宜的溫度和環(huán)境下,DNA聚合酶將脫氧單核苷酸加到引物3´-OH末端,并以此為起始點(diǎn),沿模板5´→3´方向延伸,合成一條新的DNA互補(bǔ)鏈。
  
  PCR基因擴(kuò)增儀反應(yīng)步驟
  
  分別是1.變性,2.引物退火,3.引物延伸。所謂變性是將DNA加熱至90-95℃變性,將雙鏈DNA加熱后轉(zhuǎn)為單鏈DNA做為復(fù)制的模板.而引物退火則是引物于一定的溫度下(冷卻至55-60℃)附著于模板DNA兩端。zui后在DNA聚合酶的作用下(加熱至70-75℃)進(jìn)行引物的延伸及另一鏈的合成。
  
  

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